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ATP檢測方法
三磷酸腺苷(Adenosine Tri-Phosphate, ATP)是自然界各種生命活動中共用的能量載體。無論是真核細胞還是原核細胞，都以ATP作為能量儲存和轉移的分子。ATP可作為細胞活性的一個標志物。具有代謝活性的細胞含有一定量的ATP，檢測ATP含量可作為培養細胞增殖和細胞毒性的定量指標；而在細胞發生凋亡或壞死時，其ATP含量會迅速下降。通過監測ATP含量的改變，可以評價多種藥物、生物制劑或生物活性物質引起的細胞殺傷、細胞抑制和細胞增殖作用。ATP也常作為微生物污染的一個指標，微生物繁殖引起食品、藥品等ATP含量的增高，可以被敏感地檢測到。
ATP檢測可以用成色反應、熒光、化學發光或同位素等方法實現。采用化學發光方法檢測ATP，具有更高的敏感性，并具有簡便、快速等特點，因此是目前更為流行的方法?；瘜W發光方法檢測ATP，是基于螢火蟲熒光素酶催化熒光素氧化，消耗ATP，發出光子的高效發光反應；該反應的發光效率極高，發光量與ATP含量有很好的線性關系。本公司生產的ATP檢測試劑盒，應用突變重組的螢火蟲熒光素酶，催化長時發光反應，專門測定ATP含量。
生物體內多種酶促反應以ATP為底物，消耗能量；ATP的高能磷酸鍵斷裂，形成ADP或AMP。多種具有重要生物功能的酶如激酶、ATP酶等產生ADP，通過檢測其酶促反應中ADP與ATP比值，可以間接監測酶促反應的進程。細胞在發生凋亡或壞死時，其ADP與ATP含量的變化特征不同，檢測細胞中ADP與ATP比值，也是區分細胞凋亡或壞死的一個間接指標。本公司生產的ATP/ADP檢測試劑盒，在測定ATP含量的基礎上，進一步將ADP轉化為ATP，采用相同的ATP測定方法，對ADP含量進行定量，從而得到ADP與ATP比值。單個樣品一體化的測定方法，給實驗工作帶來很大的便利。
1. 電泳法：根據核苷酸分子同時攜帶酸堿基團，在一定條件下，利用其在電場中的遷移速度不同而實現分離。
1) 紙電泳法： 將電場加在浸泡過緩沖液的濾紙上，使ATP與其他雜質分離，再利用比色法測定ATP的吸收值，計算其含量。此法是衛生部及地方采用的ATP標準檢測方法。
2) 凝膠電泳法：根據介質不同，可分為聚丙烯酰胺電泳法（PAGE），SDS-PAGE和瓊脂糖凝膠電泳法，前兩種方法常用于生物機制的研究。瓊脂糖凝膠電泳法是以瓊脂糖為介質，檸檬酸為緩沖液，利用電泳將ATP與雜質分離，實現ATP含量檢測。
3) 毛細管電泳法：以毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅動力，利用各組分間淌度和分配行為上的差異，實現ATP與雜質的分離。
2. 光學分析法：因其操作簡單、儀器要求低，常用于科研領域的ATP含量分析。
1) 分光光度法：采用ATP試劑盒，因ATP腺嘌呤堿基上存在共軛雙鍵，在紫外下有吸收峰，可用紫外分光光度法檢測ATP含量。
2) 生物發光法：利用熒光素在熒光素酶的作用下，與ATP發生反應，生成熒光素-ATP復合體，該復合體被分子氧氧化后激發熒光素發光，根據發光強弱可檢測ATP含量。
3. 層析法：利用樣品各組分之間親和力、分配系數等化學性質的差異，實現ATP與其它雜質的分離。
1) 紙層析法：是檢測核苷酸含量的常用方法之一。該方法常以異丙醇、濃氨水和水按7：1：2的混合作為展開劑。
2) 薄層層析法：該方法紙層析法原理基本相同，也是檢測核苷酸含量的常用方法之一，其常用的展開劑是正丁醇、丙酮、冰乙酸、氨水、水按7：5：3：3：2的比例混合而成。
3) 離子交換色譜法：利用樣品各組分離子交換能力或選擇系數之間的差異，實現分離，常用于工業生產中ATP含量檢測。
4) 高效液相色譜法：此方法具有強大的分離能力，操作簡單，分析時間短，靈敏度高，結果準確，是目前應用廣泛的一種ATP檢測方法
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